人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA Kit试剂盒
详细信息
货号：CK-E10504
品牌： 原鑫生物
供应商：上海原鑫生物科技有限公司
检测限： /
检测方法： 酶联免疫法双抗夹心法
应用： ELISA
适应物种： 人/动物/植物
样本： 血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织液等
规格： 96T/48T
人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)elisa试剂盒操作说明 操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒操作说明 检测试剂注意事项：
1. 此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2． 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，
3． 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4． 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟
5． 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6． 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。
7． 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8． 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。
人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒操作说明 操作步骤：
1. 取出试剂盒，于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。
2. 取出酶标板，按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的样品，空白对照加入50μl的蒸馏水；
4. 在样品孔中加入10μl的生物素；(不含空白对照孔,切忌：生物素只加样品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液；(不含空白对照孔)
6. 将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应 1小时；(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)
7. 充分清洗酶标板3-5次，保持各孔有充足的水压；(浓缩洗涤液以1：100的比例与蒸馏水稀释)
8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干；
9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl；(不含空白对照孔)
10. 20-25℃下避光反应15分钟；
11.各孔加入50μl终止液，终止反应；
